基因擴增儀通過精確控制溫度,實現(xiàn)DNA的快速、特異性和高敏感性擴增。PCR反應(yīng)體系包括DNA模板、引物、dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(如Taq酶)。在PCR過程中,儀器內(nèi)部通常采用加熱塊或加熱芯來保持溫度恒定,并使用溫度傳感器進行精確測溫。反應(yīng)過程包括變性、退火和延伸三個基本步驟,通過循環(huán)控制溫度,使DNA模板和引物在變性、退火和延伸階段都能得到最佳的溫度條件。
基因擴增儀在科研和臨床中具有廣泛的應(yīng)用,包括但不限于:
基因擴增:用于擴增特定的DNA片段,使研究人員能夠快速地檢測和分析基因序列。
定性PCR基因擴增:用于確定樣品中是否存在特定的DNA序列。
熒光/酶免終點定量DNA基因擴增:用于定量檢測樣品中的DNA含量。
基因芯片等其他基因分析應(yīng)用:為基因芯片等高通量基因分析技術(shù)提供擴增支持。
基因擴增儀可以根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn)進行分類,常見的分類方式包括:
根據(jù)功能分類:
普通PCR儀:用于簡單的DNA擴增。
實時熒光定量PCR儀:在擴增過程中實時監(jiān)測熒光信號,用于定量檢測DNA含量。
梯度PCR儀:可以設(shè)置一系列不同的退火溫度,用于優(yōu)化PCR反應(yīng)條件。
原位PCR儀:在細(xì)胞內(nèi)實現(xiàn)基因擴增,用于細(xì)胞定位和基因表達研究。
根據(jù)加熱模式分類:
立體膜加熱技術(shù):采用立體膜加熱方式,加熱均勻且效率高。
其他加熱技術(shù):如加熱塊或加熱芯等,根據(jù)具體儀器設(shè)計而定。